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见证ELISA实验从起步到辉煌

来源:http://www.sh-hayan.com/   发布时间:2015-06-12 09:13:00   作者:上海哈研

也许每一位从事ELISA检测或者在校医学生在做ELISA实验时都会遇到种种问题,或者在当时不太明白的一些问题,在此,我公司详细讲解一下ELISA实验当中可能遇到的问题和需要注意的事项供大家参考。

      ELISA实验目的:ELISA试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中所检测指标的含量。

      ELISA实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人所检测指标的 水平。用纯化的所检测指标的t抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入所检测指标的,再与HRP标记的所检测指标的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的所检测指标的呈正相关。用酶标仪在150nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人所检测指标的浓度。

      注意事项:

1  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2  浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3  各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4  请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔***孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6  底物请避光保存。

7  严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8  所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9  本试剂不同批号组分不得混用。

     上海哈研生物科技有限公司拥有良好信誉,高效的实验团队,丰富的实验经验,热情的销售人员专业经销众多国际生命科学领域的知名品牌ELISA试剂盒,标准品,细胞,生化试剂,抗体,培养基,血清,实验耗材,实验设备等实验室用品,是您一站式采购王国。为中国科研试剂权威供应商之一,质量被全国各大院校科研机构认可,并指定为Elisa试剂盒长期供应商,作为战略合作伙伴。我公司一直秉持着顾客的需要就是我们的动力,我们要满足顾客的所有需求,我们必将以饱满的热情服务每一位顾客,截止在今天,我公司已成功完成数以千计的ELISA实验,丰富的经验期待着为您服务!

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